Ekstrakt lista Engelhardia Roxburghiana

Engelhardia Roxburghiana Leaf Extract Dihydroquercetinje spoj dihidroflavonola koji se nalazi u mnogim biljkama. Pored sintetičkog dihidrokvercetina na tržištu, glavni prirodni izvor je ariš. Naša kompanija je istraživanjem na listovima Astragalus membranaceus otkrila da prirodni listovi Astragalus membranaceus također sadrže dihidrokvercetin. Kako resursi ariša postaju sve oskudniji, otkriće naše kompanije može uvelike smanjiti troškove proizvodnje dihidrokvercetina i osigurati najisplativije proizvode dihidrokvercetina na tržištu.

Kao najveći proizvođač dihidrokvercetina u Kini, KINTAI ima dva glavna procesa za pripremu dihidrokvercetina: biosintezu i ekstrakciju. Dihidrokvercetin koji trenutno proizvodimo uglavnom se ekstrahira iz ariša, a nešto se ekstrahira iz lišća vučje bobice. Biosinteza će uskoro ući u probni proizvodni test, a kada se završi, donijet će vam visokokvalitetne i jeftine proizvode dihidrokvercetina. U nastavku uglavnom predstavljamo trenutni proces ekstrakcije naše kompanije korištenjem lišća vučje bobice i metodu sinteze biosinteze. Ako vas zanima više detalja, kontaktirajte nas za profesionalnije odgovore.

COA DHQ / Taxifolin

Izvještaj o analizi tečne hromatografije

Naš istraživački tim je nedavno napravio važan iskorak u proučavanju mikrobne sinteze dihidrokvercetina

Dihidrokvercetin je važan flavonoidni spoj koji se široko koristi u hrani, medicini i poljoprivredi zbog svojih antioksidativnih, protuupalnih, antitumorskih i drugih fizioloških aktivnosti. Međutim, tradicionalne metode ekstrakcije biljaka ograničene su godišnjim dobima, geografskim uslovima i snabdijevanjem sirovinama, što rezultira visokim troškovima proizvodnje i nestabilnom proizvodnjom. Stoga, upotreba mikroorganizama za heterolognu sintezu dihidrokvercetina postaje atraktivna opcija.

Mikrobna sinteza ne samo da može izbjeći ova uska grla u ekstrakciji biljaka, već ima i prednosti kratkog proizvodnog ciklusa, niskih ekoloških zahtjeva i lake kontrole kvaliteta. Međutim, zbog ograničenja faktora kao što je metabolička regulacija, kako efikasno postići sintezu dihidrokvercetina u mikroorganizmima ostaje veliki izazov. Kroz skrining ključnih enzima, inženjering promotora, integraciju više kopija i metaboličko reprogramiranje, značajno smo poboljšali proizvodnju dihidrokvercetina i obezbijedili efikasan način za njegovu industrijsku proizvodnju.

Skrining i optimizacija ključnih enzima F3'H i F3H

Proces sinteze dihidrokvercetina oslanja se na katalizu dva ključna enzima, F3'H i F3H. F3'H katalizuje hidroksilaciju (2S)-naringenina na C-3' poziciji flavonoidnog skeleta kako bi se stvorio (2S)-eriodiktil; F3H pretvara (2S)-naringenin u dihidrokemferol. Kako bismo poboljšali proizvodnju dihidrokvercetina, testirali smo tri F3'H i pet F3H iz različitih biljaka. Nakon eksperimenata, ustanovljeno je da SmF3'H i CsF3H imaju najbolje katalitičke efekte, proizvodeći (2S)-eriodiktiol i dihidrokemferol sa prinosima od 254,1 mg/L odnosno 173,4 mg/L. Stoga smo odabrali ova dva enzima za kasniju optimizaciju sinteze.

Optimizacija promotorskih projekata

U cilju daljeg poboljšanja ekspresije SmF3'H i CsF3H, uveli smo promotorski inženjering i optimizirali nivoe ekspresije ovih ključnih enzima. Skriningom promotora različite jačine ustanovljeno je da kada su SmF3'H i SmCPR eksprimirani pod kontrolom PGAL1 i PGAL10 promotora, titar (2S)-eriodiktiola je bio najveći i dostigao 382,1 mg/L. Slično, značajno smo povećali proizvodnju dihidrokemferola regulacijom ekspresije CsF3H i upotrebom promotora različite jačine kao što su PTDH1, PGAL7 i PSSA1. Ova optimizacija pokazuje da povećanjem nivoa ekspresije ključnih enzima, efikasnost sinteze ciljnih metabolita može biti efikasno poboljšana.

 Integracija više kopija poboljšava izlaz

Kako bismo dodatno poboljšali proizvodnju dihidrokvercetina, usvojili smo tehnologiju integracije više kopija gena. Integracijom genske kopije puta sinteze dihidrokvercetina u Ty2 multi-kopijsko mjesto Saccharomyces cerevisiae, uspješno smo dobili soj FQ26ty visoke proizvodnje, čiji je titar dihidrokvercetina dostigao 71,4 mg/L. Kvantitativna analiza gena je pokazala da se broj kopija gena SmF3H, SmF3'H i SmCPR kretao od 2,87 do 3,44, što ukazuje da je integracija više kopija gena značajno poboljšala proizvodnju dihidrokvercetina. Osim toga, daljnjom integracijom više kopija gena na putu sinteze, konstruirali smo soj FQE-D seriju i uspješno povećali proizvodnju dihidrokvercetina na 74,5 mg/L. Ovaj rezultat dokazuje da je povećanje broja kopija ključnih gena sintetičkog puta efikasna strategija za povećanje prinosa ciljnih proizvoda.

Metaboličko reprogramiranje i optimizacija metabolizma ugljika

Osim optimizacije ključnih enzima i integracije gena, također smo metabolički reprogramirali sistem metabolizma ugljika Saccharomyces cerevisiae kako bismo dalje povećali proizvodnju dihidrokvercetina. Prvo smo uveli gene povezane s PAL putevima, uključujući AtPAL2, AtC4H, AtATR2 i ScCYB5, a rezultirajući soj FQ27 postigao je proizvodnju dihidrokvercetina od 87,8 mg/L. Nakon toga, dodatno smo povećali prinos na 103,9 mg/L prekomjernom ekspresijom ključnih gena ARO1/2/3 šikimatnog puta i EcAROL gena koji potiče iz E. coli. Osim toga, uveli smo i heterologni fosfoketolazni put za čvrsto povezivanje centralnog metabolizma ugljika sa sintezom eritroza{13}}fosfata, a zatim smo dobili soj FQ29 sa proizvodnjom dihidrokvercetina od 107,5 mg/L.

Optimizacija opskrbe NADPH i alfa-ketoglutarata

F3'H treba da potroši NADPH tokom katalitičkog procesa, dok F3H zahtijeva -ketoglutarat kao ko-supstrat. Stoga, kako bismo povećali opskrbu ove dvije ključne supstance, prekomjerno smo eksprimirali gene kao što su TYR1 i ZWF1 kako bismo povećali opskrbu NADPH. Eksperimenti pokazuju da ko-ekspresija TYR1 i mutantnog BDH1* povećava proizvodnju dihidrokvercetina za 20,2%, dostižući 175,8 mg/L. Osim toga, prekomjerna ekspresija ARO8 dodatno je promovirala proizvodnju -ketoglutarata, što je rezultiralo proizvodnjom dihidrokvercetina koja je dostigla 206 mg/L. Konačno, prekomjernom ekspresijom IDH1, dobili smo visokoprinosni soj FQ38 sa prinosom od 235,1 mg/L.

Istraživanje industrijalizirane proizvodnje

Na osnovu optimizacije u laboratorijskoj skali, dalje smo sproveli eksperimente fermentacije sa napajanom šaržom u bioreaktoru od 5 L. Dodavanjem 5 g/L CaCO3 tokom procesa fermentacije, uspješno smo povećali titar dihidrokvercetina na 873,1 mg/L u roku od 114 sati, postavljajući novi proizvodni rekord.

Ukratko, značajno smo poboljšali efikasnost mikrobne sinteze dihidrokvercetina kroz sistematski metabolički inženjering i optimizaciju procesa fermentacije. Ovo istraživanje ne samo da pruža tehničku osnovu za industrijsku proizvodnju dihidrokvercetina, već također pruža referencu za mikrobnu sintezu drugih biljnih sekundarnih metabolita.

Dodaci prehrani
Funkcionalne namirnice
Kozmetika

U eri kada su zdravlje i dobrobit u fokusu, DHQ je lider u potrazi za dugovječnošću, vitalnošću i ukupnim dobrom. Kao najveći dobavljač ekstrakta ariša DHQ u Kini, Kintai je vaš omiljeni partner za visokokvalitetna, prirodna rješenja za podršku vašim zdravstvenim i wellness ciljevima.Ako želite kupiti visokokvalitetneEkstrakt lista Engelhardia Roxburghiana, slobodno nas kontaktirajte nasales@kintaibio.comili povratne informacije na sljedećoj stranici.

Popularni tagovi: Engelhardia roxburghiana ekstrakt lista, Kina engelhardia roxburghiana ekstrakt lista proizvođači, dobavljači, tvornica